MUCOSA ORAL, EXTRACCION CASERA ADN

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Objetivo

Extraccion de  ADN de las células de descamación del epitelio mucoso del interior de la boca. Después de la extracción, el ADN extraído lo conservaremos en alcohol de 70º.
Material.
- Agua destilada o mineral - Alcohol de 96º muy frío - Cucharillas de plástico
- Palillo o varilla de vidrio - Sal común - Detergente lavavajillas
- Vasos desechables - Tubo de ensayo - Gradilla
- Tubos eppendorf - Alcohol de 70º


Procedimiento.


  1. Preparar un tubo de ensayo con alcohol etílico de 96 º por cada extracción. 
  2. Poner un poco de agua en un vaso y enjuagarse la boca enérgicamente durante al menos medio minuto para arrastrar el mayor número posible de células de descamación de la mucosa bucal. [antes de hacerlo conviene haber tragado saliva para eliminar la acción de los enzimas contenidos en ella].
  3. PRETRATAMIENTO
  4. Colocar unos 20 ml de agua destilada con dos pizcas de sal, en otro vaso y un par de gotas de detergente lavavajillas.
  5. EXTRACCCION
  6. Expulsar el agua en el vaso de precipitados sobre la solución anterior. Dejar actuar durante unos 10 minutos, removiendo de vez en cuando suavemente para disolver estos componentes evitando la formación de espuma.
  7. A continuación, añadir la solución suavemente al tubo de ensayo que contiene el alcohol muy frío dejándola resbalar por la pared del tubo inclinado. Dejar reposar durante 2 ó 3 minutos sin moverlo en absoluto
  8. PURIFICACION
  9. Tras estos minutos de reposo, el ADN tiende a subir hacia la superficie del alcohol. Entonces podremos recogerlo utilizando una varilla de vidrio, o un palillo. Para ello, se en la masa de ADN y se extrae suavemente mientras se hace girar entre los dedos.
  10. Suspender el ADN extraído en un eppendorf con Alcohol de 70º













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