LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CITOGENETICA

DETERMINACION DEL FACTOR RH POR PCR OBJETIVO El objetivo de esta practica es introducir a los estudiantes en los principios y practica de la PCR, mediante el estudio del RH , mediante la tecnica de la PCR. MATERIALES Y REACTIVOS. Tampon de electroforesis concentrado 10x Agarosa Mix pcr Control positivo rh Muestra de adn ( saliva ) Micropipetas Puntas de pipeta con filtro EQUIPOS Termociclador Microondas Cubeta de electroforesis Peso PROCEDIMIENTO 1. En primer lugar deberemos extraer el ADN de una muestra de saliva. En nuestro caso tenemos las muestras congeladas a -80C, por lo que sólo tendremos que sacarlas, descongelarla y homogeneizar 2. Utilizamos 2,5 l (100-250 ng) del ADN de cada alumno para cada reacción de PCR.   a) Preparar un control negativo de amplificación, para ello colocar 2,5 l de agua libre de nucleasas en   lugar del ADN, esto sirve para saber si los reactivos o micropipetas y puntas pueden ...

PREPARACIÓN DE GELES DE AGAROS A OBJETIVO El objetivo de este experimento consiste en desarrollar una comprensión básica de la teoría de la electroforesis y en adquirir práctica con los procesos de separación de diversas moléculas a través de la electroforesis horizontal sobre gel. FUNDAMENTO  La electroforesis en gel de agarosa se utiliza comúnmente para separar moléculas en función de su carga, tamaño y forma. Se trata de un medio de separación especialmente efi caz para las biomoléculas cargadas como el ADN, el ARN y las proteínas. A pesar de que la electroforesis en gel de agarosa sea una técnica simple y fácil, posee dotes de separación efi - caces. El gel se fabrica disolviendo polvo de agarosa en una solución tampón hirviente. A continuación, se deja enfriar la solución a 55°C y se vierte en un soporte, donde se solidifi ca. Se sumerge después el soporte en un equipo de electroforesis de electrodos que contiene solución tampón. Para preparar las muestras para l...